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1. 过表达载体构好后续做什么

1、过表达载体构好后续做什么

当拿到一个基因的DNA片段后，就需要把它导入一个载体，一方面长期保存。另一方面也需要以载体为媒介将基因导入受体细胞中。基因表达载体的构建是基因工程的核心。常用的载体有细菌质粒，噬菌体和动植物病毒。其中质粒载体最常用。

钙离子处理微生物细胞→感受态细胞→将基因表达载体与感受态细胞混合在缓冲液中→一定温度下促使感受态细胞吸收DNA分子。2质粒可以独立复制，也可以整合到细胞的核DNA中，随着核DNA的复制而复制。

基因过表达的步骤是：1，构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上，载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter，不同系统中采用的promoter完全不同2，将克隆导入表达细胞中。

基因过表达的步骤是： 1，构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上，载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter，不同系统中采用的promoter完全不同。 2，将克隆导入表达细胞中。

首先确定你是要做原核过表达或是真核过表达，两种的过表达载体不一样，而且不同的细胞中过表达用的promoter也不太一样，你要自己好好查查。选定载体后，构建质粒，先放入克隆菌中大量扩增，提取质粒。

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