载体的构建终止子用什么(载体构建的原理)
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于载体的构建终止子用什么的问题,于是小编就整理了1个相关介绍载体的构建终止子用什么的解答,让我们一起看看吧。
1、在构建表达载体时一般采用强的和强的终止子
但在构建表达载体时,为了稳定载体系统,防止克隆的外源基因表达干扰载体的稳定性,一般都在多克隆位点的下游插入一段很强的rrB核糖体RNA的转录终止子。
对RNA聚合酶起强终止作用的终止子在结构上有一些共同的特点,即有一段富含A/T的区域和一段富含G/C的区域,G/C富含区域又具有回文对称结构。这段终止子转录后形成的RNA具有茎环结构,并且有与A/T富含区对应的一串U。转录终止的机制较为复杂,并且结论尚不统一。
表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因;常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为黏性末端,也有平末端),采用DNA连接酶连接,导入生物体实现表达。标记基因可帮助识别质粒并检测是否成功整合到染色体DNA中。
合理设计启动子和终止子:在表达载体中加入合适的启动子和终止子可以调控目的基因的表达水平。启动子应该是特异性的,可以确保外源基因在宿主细胞中的表达。终止子可以保证转录的准确终止,防止意外的后效应。
含有许多内含子,增强子等片段,并且你用酶切来获得的片段在酶切位置的精确性和单一性上是很难控制的。而通过逆转录PCR你直接就可准确得获得此基因的完整并且浓度很高的片段。对于第二个问题在构建表达载体的时候一般都需要具有启动子和终止子,所以我觉得你的说法是正确的。
关于载体的构建终止子用什么和载体构建的原理的介绍到此就结束了,不知道你从中找到你需要的信息了吗 ?如果你还想了解更多这方面的信息,记得收藏关注本站。 载体的构建终止子用什么的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于载体构建的原理、载体的构建终止子用什么的信息别忘了在本站进行查找喔。
[免责声明]本文来源于网络,不代表本站立场,如转载内容涉及版权等问题,请联系邮箱:3801085100#qq.com,#换成@即可,我们会予以删除相关文章,保证您的权利。 转载请注明出处:http://www.mxzdyx.cnhttp://www.mxzdyx.cn/zbpj/7587.html