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1. 在线设计引物网站有哪些-如何快速设计shRNA

1、在线设计引物网站有哪些-如何快速设计shRNA

网址引物设计和验证的推荐网站为：Primer-Blast。这是一个专门设计用于在已知序列上设计引物或探针的工具。使用BLAST-Primer，您可以输入一个序列或一组序列，并为这些序列设计引物或探针，以便用于PCR扩增或杂交检测等分子生物学实验。需要注意的是，NCBI还有一个网站叫：BLAST。注意二者不要弄混。

The Primer Generator 在线引物设计程序。 Primer 3 比较有名的在线引物设计程序。 Primo Pro 4 在线PCR引物设计java系列软件。 Web Primer 斯坦福大学提供的在线引物设计软件。

要进行shRNA载体构建，首先需要根据自己的基因，设计出对应的 靶点 、 loop序列 ， 酶切位点序列 ，详见 LncRNA的shRNA慢病毒载体引物设计 - 引物先用10000g在4°离心2min，再按照说明书的要求，加入DEPC或者无酶ddH2O将寡核苷酸稀释为100 μM。

基因研究中，敲除基因，研究该基因的功能是最常用的套路。一般 ShRNA 可通过 RNA 干扰来抑制基因的表达， 是基因研究中必不可少的环节。下面就主要围绕设计 ShRNA 引物序列，手把手教你构建 ShRNA 质粒，轻松敲基因。

你要克隆7kb的片段是吧？！一般search出来的结果都不理想，需要自己手动设计。具体设计方法对于新手来说有点复杂，你问下你们实验室的学长，同时在网上查下设计引物的一般原则。

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