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如何利用农杆菌Ti质粒构建植物克隆载体(农杆菌ti质粒的基因结构及各个结构的功能)

如何利用农杆菌Ti质粒构建植物克隆载体(农杆菌ti质粒的基因结构及各个结构的功能)

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  1. 基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体,需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA...

1、基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体,需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA...

T-DNA会带着目的基因进入染色体的断裂部分(插入是随机的),至于细节,还在研究 至于质粒,它的确会复制,但它容易在细胞复制的时候丢失,所以一般的我们认为只有导入了染色体的基因才可以稳定遗传。

土壤农杆菌是用来侵染植物的,它主要含有一个叫Ti质粒的T-DNA片段,用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体.把目的基因重组人Ti质粒上的T-DNA片段中,再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。这一方法主要用于植物基因工程中的外来基因的导入。

农杆菌转化法的过程如下:转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上--进入农杆菌--导入植物细胞--目的基因整合到植物染色体的DNA上--目的基因得以稳定维持和表达。获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因。基因表达载体的构建:将目的基因与载体(大多数选用质粒)用DNA连接酶连接起来。

根据农杆菌的这种特点,如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。它是将目的基因导入植物细胞采用最多的方法。因此,该植物可产生稳定的转基因后代。

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