大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于bifc载体构建的问题，于是小编就整理了4个相关介绍bifc载体构建的解答，让我们一起看看吧。

1. 乙烯和蛋白互作
2. 双分子荧光互补的BiFC技术的应用
3. 双分子荧光互补的BiFC技术原理
4. 请教关于双分子荧光互补技术

1、乙烯和蛋白互作

OsTPR1作为水稻的TPR类蛋白，也很有可能与其特定的水稻乙烯受体存在相互作用，并对该乙烯信号的传导和影响水稻生长发育起重要的作用。

乙烯可以诱导果胶酶产生。乙烯作用机理可以促进RNA和蛋白质的合成，乙烯对IAA氧化酶、过氧化物酶、淀粉酶、纤维素酶、果胶酶、苯丙氨酸解氨酶等20多种酶都具有较强的激活作用。

乙烯是一种植物激素，可以调节生长、发育和衰老，所有的果实在发育期间都会产生微量乙烯，在果实未成熟时乙烯含量很低，在果实开始成熟时乙烯含量会大幅度增加，所以乙烯可以用作催熟剂。

乙烯广泛存在于植物的各种组织、器官中，是由蛋氨酸在供氧充足的条件下转化而成的。它的产生具有“自促作用”，即乙烯的积累可以刺激更多的乙烯产生。

对拟南芥转录因子进行了同源互作网络分析，结果表明乙烯（ETH）和茉莉酸（JA）途径具有关键的特征，构成了以ERF4/WRKY40、MYC2和多个JAZ蛋白为核心的蛋白互作网络。

2、双分子荧光互补的BiFC技术的应用

由于重建后的荧光蛋白结构较稳定，双分子荧光互补技术还可以用于研究蛋白质之间的弱相互作用或瞬间相互作用。BiFC技术的最大缺陷是多个BiFC系统对温度敏感。温度高时，片段间不易互补形成完整的荧光蛋白。

本项目以日本晴水稻为材料，利用酵母双杂交，以及水稻原生质体双分子荧光互补技术（BiFC）双层次方法探讨水稻TPR蛋白OsTPR1与乙烯受体相互作用情况，并且进一步对它们互作的关键区域进行了研究。

年，Shyu等又将BiFC技术和FRET技术结合起来，建立了基于双分子荧光互补的荧光共振能量转移技术（BiFC-FRET），BiFC2FRET采用了青色的荧光蛋白cerulean和1个黄色的基于venus的BiFC系统联用，能同时检测3个蛋白之间的相互作用。

双分子荧光互补技术是指将荧光蛋白多肽链在一些非保守氨基酸上切割，形成两个非荧光的N端和C端多肽片段。这两个荧光蛋白片段分别连接到一对可以相互作用的靶蛋白上。

3、双分子荧光互补的BiFC技术原理

双分子荧光互补技术是指将荧光蛋白多肽链在一些非保守氨基酸上切割，形成两个非荧光的N端和C端多肽片段。这两个荧光蛋白片段分别连接到一对可以相互作用的靶蛋白上。

当2个融合蛋白在细菌内表达时能够特异的定位到eIF4A的适配子上，2个荧光片段彼此靠近互补，可以被激发产生荧光，从而照亮连接有eIF4A适配子的RNA。Ozawa等用基于GFP的BiFC系统标记并研究了真核细胞线粒体RNA。

本项目以日本晴水稻为材料，利用酵母双杂交，以及水稻原生质体双分子荧光互补技术（BiFC）双层次方法探讨水稻TPR蛋白OsTPR1与乙烯受体相互作用情况，并且进一步对它们互作的关键区域进行了研究。

由于重建后的荧光蛋白结构较稳定，双分子荧光互补技术还可以用于研究蛋白质之间的弱相互作用或瞬间相互作用。BiFC技术的最大缺陷是多个BiFC系统对温度敏感。温度高时，片段间不易互补形成完整的荧光蛋白。

这个技术一般都是没办法时候的办法，就不举例子啦。【三】荧光双分子互补， bi-molecular fluorescence complementation（BiFC）， 人们把绿色荧光蛋白 GFP 分子分割成两段，分别与接受测试的两个蛋白融合表达。

4、请教关于双分子荧光互补技术

其他蛋白质片段互补技术主要通过检测底物的变化来间接的反映蛋白质间的相互作用，不能确定蛋白质相互作用的位置。由于重建后的荧光蛋白结构较稳定，双分子荧光互补技术还可以用于研究蛋白质之间的弱相互作用或瞬间相互作用。

将eIF4A蛋白的RNA适配子（aptamer）连接到RNA的末端。当2个融合蛋白在细菌内表达时能够特异的定位到eIF4A的适配子上，2个荧光片段彼此靠近互补，可以被激发产生荧光，从而照亮连接有eIF4A适配子的RNA。

这两个荧光目标产物可能是染料或者染料添加剂。染料可以在特定的可见光下发出光谱，而染料添加剂可以增加染料的荧光强度，以及改变染料的光谱特性。

Firefly luciferase和Renilla luciferase被称为报告基因，是因为在表达调控研究时，利用两者表达产生的荧光比值可监控微观层面上的分子间相互作用。

OsTPR1作为水稻的TPR类蛋白，也很有可能与其特定的水稻乙烯受体存在相互作用，并对该乙烯信号的传导和影响水稻生长发育起重要的作用。

到此，以上就是小编对于bifc载体构建的问题就介绍到这了，希望介绍关于bifc载体构建的4点解答对大家有用。