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表达载体的构建与表达-表达载体的基本特征

表达载体的构建与表达-表达载体的基本特征

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  1. 目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达

1、目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达

目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达是生物技术领域的重要研究内容。目的基因重组表达载体的构建是将目的基因与适当的调控序列(如启动子、转录终止信号序列等)和标记基因连接在一起,形成重组表达载体。这个过程通常需要使用限制性核酸内切酶和连接酶等工具酶,以确保重组载体的正确性和稳定性。

获取目的基因:最简单的是直接从cDNA文库找,不然就要自己用mRNA逆转录出cDNA,然后PCR,电泳检测,回收。酶切和连接:找一个质粒载体,根据载体的说明书选择内切酶,一般是双酶切。把载体和你的目的片段用一样的酶切了,然后混合了连接。

选择基因:首先,我们需要确定要串联重组的基因。这些基因可以是来自同一生物体的不同基因,也可以是来自不同生物体的基因。选择基因时,需要考虑它们在生物体中的功能、表达水平和相互作用。例如,如果我们想研究代谢途径,可以选择参与该途径的多个关键酶编码基因进行串联重组。

【结论】 成功构建了人resistin基因原核表达载体,且构建的载体能表达出含目的蛋白的融合蛋白,为下一步研究打下了实验基础。

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