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有构建好的载体质粒吗,构建载体需要的条件

有构建好的载体质粒吗,构建载体需要的条件

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  1. 有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA...

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第一个办法 ,如果你有这个载体的通用引物,可以用这俩通用引物做PCR,然后电泳观察条带的大小,如果条带和你的mRNA的大小相近(应该是略大于mRNA的,因为带有了小部分的载体序列),那就说明这里边是插入目的基因的。

目的基因重组表达载体的构建是将目的基因与适当的调控序列(如启动子、转录终止信号序列等)和标记基因连接在一起,形成重组表达载体。这个过程通常需要使用限制性核酸内切酶和连接酶等工具酶,以确保重组载体的正确性和稳定性。

不一定表达。首先重组基因导入了受体细胞的意思是第二步构建好的含有目的基因的表达载体(一般情况下叫重组质粒,或者叫目的基因表达载体更好点)导入了受体细胞。

当拿到一个基因的DNA片段后,就需要把它导入一个载体,一方面长期保存。另一方面也需要以载体为媒介将基因导入受体细胞中。基因表达载体的构建是基因工程的核心。常用的载体有细菌质粒,噬菌体和动植物病毒。其中质粒载体最常用。

首先这应该是个融合表达载体。应该考虑后面的读码框问题。就是应该适当在后面的酶切位点前加入0-2个碱基。使得你的目的基因和egfp在同一读码框内。KOZAK序列在真核细胞中表达有作用,这就看你后期的实验目的了。不过不加的话应该只是效果没有加了好,而不是没有效果。下游当然不用加。

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