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基因表达载体构建双筛选-基因表达载体的构建实验步骤

基因表达载体构建双筛选-基因表达载体的构建实验步骤

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于基因表达载体构建双筛选的问题,于是小编就整理了1个相关介绍基因表达载体构建双筛选的解答,让我们一起看看吧。

  1. 基因表达载体的构建是什么?

1、基因表达载体的构建是什么?

基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体,首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。

启动子、终止子:启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基。RNA从启动子开始转录、翻译,到终止子结束。整个过程完成后便产生所需蛋白质。如果不清楚RNA的转录翻译过程,可以再细说。标记基因:用于检测是否已经植入目的基因。植入的成功率其实很低,所以有必要选出已经植入的个体。

插入的目的基因只是结构基因部分,其表达需要调控序列,因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子,后须有终止子。通过载体把目的基因片段导入活细胞。构建基因表达载体也就是把目的基因和载体连接,使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。

阶段性目的是将目的基因装载到载体上然后转导到细胞核内的基因组中,最终目的是得到该基因表达的蛋白产物。

载体构建目的 ①用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆)。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。

到此,以上就是小编对于基因表达载体构建双筛选的问题就介绍到这了,希望介绍关于基因表达载体构建双筛选的1点解答对大家有用。

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