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1. ...利用RNAi技术研究该基因的功能?RNAi载体怎么构建?

1、...利用RNAi技术研究该基因的功能?RNAi载体怎么构建?

“酶切-连接”方法是通常构建RNA干扰载体最常用的方法，被广泛应用于各种生物之中。其构建过程是：通过PCR方法得到目的基因的片段（添加了合适的酶切位点），使之正反相连形成顺式片段和反式片段。

此外，基因功能的线索可以通过研究基因表达 的时间和空间来获得。如果基因的表达限制在多细 胞生物的特定器官或组织，或者器官或组织中的某 类细胞，那么这种定位信息就可以用来推测基因产 物的一般功能。

RNAi是一种高效的特异性强的基因阻断技术。可以快速分析靶基因的功能，RNAi发展迅速，已成为功能基因组研究和反向遗传学研究的有力工具。RNAi技术被《Science》杂志评为2002年度的十大科技突破。RNAi的分子机制 ①外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内，产生一些dsRNA。

在水稻中利用RNAi技术来验证定位的基因 。如根据定位的矮秆或多蘖基因所在的BAC设计引物 ，获得小片段cDNA ，再将其连到载体中通过农杆菌介导法导入正常的植物体内 ，让其在植物体内表达 。RNAi的发现 首次发现dsRNA 能够导致基因沉默，来源于线虫的研究 。

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