质粒载体构建的图谱-质粒载体构建的图谱是什么
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1、质粒载体的图谱怎么看?
具体如下:图谱中的ori表示质粒的复制起点。质粒的复制起点决定了质粒的宿主及质粒的拷贝数相关,它是质粒中的一段特定序列,富含AT和重复序列。图谱中的AmpR、KanaR等表示质粒载体中的筛选标签,多为抗生素抗性基因,方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。特点是单词最后会以大写R或上标r结束。
图1:质粒——基因工程的忠实载体 解读质粒图谱的关键元素 在探索质粒图谱之前,了解其基本构成至关重要。改造过的质粒通常具备复制起点、筛选标记和多克隆位点这三个核心元件(图2)。复制起点(ori)是启动复制的关键,它决定了质粒在何处启动复制,以及在细胞中的拷贝数量。
如下图的pUC系列和pBRR系列都是pMB1复制子,但是质粒图谱上是看不出来的,基本上做个了解即可,自己做到心里有数质粒是什么类型的,拷贝数多少,防止质粒浓度达不到要求。复制起点还有一个比较重要的点就是穿梭质粒。
方法一:使用Vector NT 软件 做分子实验,经常和不同的质粒打交道,了解各种质粒的图谱信息是必需的,invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的。
图谱中的AmpR、KanaR等表示质粒载体中的筛选标签,多为抗生素抗性基因,方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。特点是单词最后会以大写R或上标r结束。图谱中的MCS或者许多内切酶排排坐的部分,就是质粒的多克隆位点。
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