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1. flag标签作用

1、flag标签作用

FLAG标签是用于蛋白质纯化和检测的人工多肽序列，常用于在目标蛋白上引入以便后续研究。FLAG标签的序列为DYKDDDDK（或DYKDDDDKDYKDDDDK），其中D表示天冬氨酸（Aspartic Acid），Y表示酪氨酸（Tyrosine），K表示赖氨酸（Lysine）。

更为重要的是，该标签具有更高的检测敏感性，特别适合于哺乳动物细胞表达系统中低表达水平蛋白质的检测。而对于某些需要维持生物活性的小分子目标蛋白，在其免疫沉淀纯化中，结合一个高效接头结构的3×FLAG标签表现出更显著的纯化效果。

Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统，广泛应用于Western blotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸（Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys）组成的多肽片断。

Flag标签并不会对酶的活性产生直接的影响。Flag标签不改变蛋白质的氨基酸序列以及其所具有的催化性质。如果仔细地进行酶活性测定的设计和操作，Flag标签不应对其测定的可靠性产生太大的影响。

FLAG作为标签蛋白，其可以被抗FLAG的抗体识别，这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。融合在N端的FLAG，其可以被肠激酶切除（DDDK），从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。

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