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1. 请问C端带标签的重组蛋白用哪个载体构建?

1、请问C端带标签的重组蛋白用哪个载体构建?

首先把表达标签载体选择好了，是HA还是FLAG、HIS还是EGFP等等， 然后确定目的克隆蛋白编码DNA的来源，可以购买，也可以自己从基因组DNA中PCR 之后就是要把两者接在一起，首先要根据表达载体选择酶切位点，之后把PCR产物酶切，然后纯化酶切产物，再用连接酶把载体和目前DNA连接起来，再纯化就可以了。

一般情况下，在低层大气中，气温是随高度的增加而降低的。但有时在某些层次可能出现相反的情况，气温随高度的增加而升高，这种现象称为逆温。出现逆温现象的大气层称为逆温层。

推荐客户使用钟鼎生物的自主载体pAZ-V5载体来进行实验，利用载体自带的V5信号肽序列帮助蛋白穿膜分泌表达至胞外，为了保持蛋白的N端活性，我们在C端添加6XHis-Tag便于重组蛋白的检测和亲和纯化。

原核表达用PET32载体，载体自带上有组氨酸标签。his标签蛋白就是：六个组氨酸。一般存在于重组蛋白氮端或碳端，便于纯化该重组蛋白，组氨酸可以特异性的结合镍离子，带有组氨酸标签的重组蛋白可以被镍柱吸附，从而达到纯化的目的。也就是在表达载体上面，特别加六个组氨酸的碱基序列，目的就是纯化。

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