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1. 大肠杆菌表达系统——PET-T7系统

1、大肠杆菌表达系统——PET-T7系统

大肠杆菌作为生物技术的黄金平台，其PET-T7表达系统在蛋白质工程中占据重要地位。要成功在宿主菌中实现重组蛋白的高效表达，一个完备的系统不可或缺。首先，表达过程分为三个关键步骤：导入编码目标蛋白的质粒（如pET-30a（ ），选择适合的生长阶段，以及适时诱导蛋白的合成。

T7启动子是当今大肠杆菌表达系统的主流，这个功能强大兼专一性高的启动子经过巧妙的设计而成为原核表达的首选，尤其以Novagen公司的pET系统为杰出代表。

t7启动子转录终止是正常情况。t7表达系统已被广泛地应用于蛋白质的表达，其中在原核生物中的应用最为普遍（参见，专利文献1）。最典型的代表是novagen公司研发的pet系列质粒，这类质粒目前已被广泛地应用在大肠杆菌中高效地表达蛋白质。

pET 系统是在大肠杆菌中克隆和表达重组蛋白的最强大系统。根据最初由 Studier 等开发的 T7 启动子驱动系统， Novagen 的 pET 系统已用于表达成千上万种不同蛋白。控制基础表达水平pET 系统提供 6 种载体 - 宿主菌组合，能够调节基础表达水平以优化目标基因的表达。

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