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1. “基因敲除狗”,“基因敲除猪”,CRISPR/Cas9到底是怎样一个技术_百度...

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CRISPR-Cas9的复合体犹如导弹，通过sgRNA引导Cas9，实现基因编辑的精细操作。它可以是基因敲除，通过DSB引发NHEJ修复导致基因失活，或者通过Cas9 nickase提高编辑的特异性。基因敲入则利用HDR修复技术导入目标基因，尽管成功率相对较低，但通过优化策略可以提高效率。

CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA（guide RNA）来识别目的基因组序列，并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链，形成双链断裂，损伤后修复会造成基因敲除或敲入等，最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。 CRISPR-Cas9的广泛应用 基因敲除（Knock-out） Cas9可以对靶基因组进行剪切，形成DNA的双链断裂。

CRISPR-Cas9用途：利用两种修复机制，可以实现基因的插入和敲除。没有模板的情况下，利用NHEJ修复，随机插入或缺失序列造成基因敲除。有模板存在的情况下，可通过HDR修复在剪切位点引入目的修饰基因，实现基因的定点修改。

但Cas9系统改变的是DNA，而不是RNA.专业人士认为CRISPR平台事实上也可以用来修改RNA。CRISPR最开始被发现在细菌中可将一段遗传密码换成另一段遗传密码，所以被称为“分子剪刀”。在CRISPR-Cas9系统中，Cas9是切割DNA的酶。

CRISPR-Cas9的广泛应用：基因敲除（Knock-out）Cas9可以对靶基因组进行剪切，形成DNA的双链断裂。在通常情况下，细胞会采用高效的非同源末端连接方式（NHEJ）对断裂的DNA进行修复。但是，在修复过程中通常会发生碱基插入或缺失的错配现象，造成移码突变，使靶标基因失去功能，从而实现基因敲除。

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