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1、病毒介导的基因沉默(VIGS)机制
病毒诱导的基因沉默 (virus induced gene silencing,VIGS)是指携带目的基因片段的病毒侵染植物后,随着病毒的复制和转录而特异性的诱导序列同源基因mRNA降解或被甲基化等修饰,从而引起植物内源基因沉默、引起表型或生理指标变化,进而根据表型变异研究目标基因的功能。
在分子生物学的前沿,病毒诱导基因沉默(VIGS)如同一把精细的手术刀,通过病毒载体携带特定基因片段,悄然在植物细胞内引发基因沉默现象。这项发现始于1995年,术语正式提出在1997年,自此,VIGS凭借其高效性和广泛应用,成为揭示基因功能的重要工具。
RNA干扰,简称RNAi,是一种自然的基因沉默机制,通过小分子RNA分子介导的切割过程来特异性地降低目标基因的表达。在vigs基因沉默中,RNA干扰起着重要的作用。1)RNA干扰的机制包括三个主要步骤:合成小干扰RNA(siRNA)、RISC复合体的形成和靶基因mRNA的降解。
揭示VIGS实验中的病毒载体奥秘VIGS,即病毒诱导的基因沉默,是一种利用病毒作为媒介实现基因表达调控的技术。它通过操控siRNA、miRNA和piRNA途径,分别实现转录后和转录水平的基因沉默,从而深入了解基因功能和调控机制。其中,siRNA和miRNA的区别在于双链RNA的配对程度,siRNA是完全配对,而miRNA则是部分配对。
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