载体构建农杆菌转化,农杆菌转化法的原理是基因重组
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于载体构建农杆菌转化的问题,于是小编就整理了1个相关介绍载体构建农杆菌转化的解答,让我们一起看看吧。
1、农杆菌转化法的原理?
农杆菌转化法原理:
nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位(受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞),并诱导产生冠瘿瘤或发状根。
nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减速分裂稳定的遗传给后代,这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。
原理是构建双元表达载体系统,由两种质粒组成,一种是位于大肠杆菌中的穿梭质粒,另一种是位于农杆菌中的辅助性质粒。
将重组质粒电转化到农杆菌感受态细胞中后,用含有重组质粒的农杆菌去侵染植物根部切口,通过辅助性质粒的Vir区表达蛋白与重组质粒T-DNA区的反式作用激活T-DNA的转移,从而将目的片段整合到植物细胞基因组中。随着愈伤组织的形成,使得新生细胞均含有该目的片段的基因。
原理:基因重组
步骤:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上——进入农杆菌——导入植物细胞——目的基因整合到植物染色体的DNA上——目的基因得以稳定维持和表达
到此,以上就是小编对于载体构建农杆菌转化的问题就介绍到这了,希望介绍关于载体构建农杆菌转化的1点解答对大家有用。
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