分子克隆构建重组载体目的-克隆技术的dna层次分为哪个层次?
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1、克隆技术的dna层次分为哪个层次?
克隆(clone)的意思是指无性繁殖,通俗的说就是只用一个生物的基因,复制出相同的生物。
从对象来说,有分子,细胞,器官,个体几个层次,各自都有对应的实验技术。
1、分子层次克隆,主要是指DNA的重组技术。
该技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。
2、细胞层次克隆,即细胞体外培养。
细胞培养技术指的是细胞在体外条件下的生长,在培养的过程中细胞不再形成组织(动物)。培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中,由于环境的改变,细胞的移动或受一些其他因素的影响,培养时间加长,传代导致细胞出现单一化型。
(1)细胞类型(细胞类型根据是否附于支持物上生长的特性,分为 贴附型、悬浮型。)
贴附型(细胞贴附在支持物表面生长,只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞(Anchorrage-dependent cells)这种现象与细胞分化有关。)
贴附型细胞的分型:
1.成纤维型细胞:(fibroblast) 来自中胚层
2.上皮型细胞(epithlium cell type) 来自外胚层。
3. 游走型细胞(wandering cell type)
4. 多形型细胞(polymorphic cell type)
悬浮型(不贴附在支持物生长,胞体圆形,在培养液中生长空间大,可长时间的生长,繁殖旺盛便于做细胞代谢研究。)
(2)增殖
生命期
1.原代培养期(primary culture)
2.传代期(passage)
3.衰退期
生存期
1. 潜伏期(latent phase) :
2.指数增生期(logarithmic growth phase):
3.停滞期(stagnate phase)
3、器官层次克隆,包括组织工程,和干细胞体外培养技术。目前除了皮肤,其他器官也没有完全实现。
4、个体层次克隆,如克隆羊,目前可以用体细胞的细胞核与去核的卵细胞融合后实现。
克隆技术现阶段来说还是有很多问题的,同时技术也并不是很成熟,国际上反对克隆技术的有很多,支持的也不少。这是一项具有争议的技术,反正对于我来说,先进技术不存在好坏,就看它掌握在什么人的手里。
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