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如何看构建的载体没有移码(载体构建移码突变)

如何看构建的载体没有移码(载体构建移码突变)

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  1. 我要将一段基因克隆到真核表达载体里面进行表达,但是不知道怎么判断会不...

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用的什么软件?一般的软件都可以直接显示翻译后氨基酸序列吧。看看就知道了。

一般标记基因的DNA序列是已知的,若选用抗氨苄青霉素基因,则可在目的基因导入后用氨苄青霉素来处理受体细胞,若无异常,则抗氨苄青霉素已合成,说明基因已得到表达。标记基因的作用在于便于检测目的基因的情况。因为标记基因和目的基因同位于运载体上,要导入都导入,要表达则都会表达。

区别主要在表达重组元件还有基因标记。promoter,terminater是宿主识别的的,真核可能还需要enhancer,重组到基因组中的话,需要介导重组的序列。筛选标记绝大多数不一样。真核表达载体在宿主中以质粒形式存在的,可以复制。哺乳动物细胞里没有质粒,外源基因整合到基因组中的,所以不能扩增。

只是这种表达通常都是由诱导型启动子控制的,所以如果只是克隆,不进行诱导,外源基因也不会表达的。而载体上的抗性基因,应该是有一些组成型的启动子调控。下面有关于克隆载体和表达载体的比较,可以参考一下。

载体是一种DNA分子,常常用于将外源基因导入到细胞中进行表达。不同的载体长度和类型对基因的稳定性和表达效率都有一定的影响。常见的表达载体包括质粒和病毒,载体长度一般在数千到数万个碱基对之间。

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